服(fu)務介紹:
新貝生(sheng)(sheng)物(wu)擁有多年的蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)表達(da)經驗(yan),已成功交付(fu)很(hen)多疑難蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)的交付(fu),包括毒性蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)、生(sheng)(sheng)長因子(zi)、酶等(deng)。主要(yao)應用于:作為抗原制備抗體;參與(yu)(yu)細(xi)胞(bao)實驗(yan)與(yu)(yu)動物(wu)實驗(yan);測定蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶活;研究蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)相(xiang)互作用(免疫共(gong)沉淀(dian),GST pull down);蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)結(jie)晶結(jie)構研究,免疫組化實驗(yan)等(deng),不(bu)同的應用對于蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)的要(yao)求也(ye)互不(bu)相(xiang)同。在進行蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)表達(da)時,通常(chang)要(yao)考慮以下幾點:
蛋(dan)白本身(shen)特性:蛋(dan)白的分子量大(da)小,蛋(dan)白來源(yuan)/物種,是否為毒性蛋(dan)白,蛋(dan)白翻(fan)譯(yi)后(hou)修飾程(cheng)度,蛋(dan)白結(jie)構復(fu)雜程(cheng)度,在細胞(bao)內外的定位等;
蛋白(bai)表達系(xi)(xi)統(tong)選擇(ze):不同蛋白(bai)表達系(xi)(xi)統(tong)有(you)不同的(de)(de)優(you)勢,如表達量高低(di),能否(fou)糖基化修(xiu)飾等(deng),結合蛋白(bai)應用(yong)并(bing)全面考慮,選擇(ze)最合適的(de)(de)蛋白(bai)表達系(xi)(xi)統(tong);
蛋白(bai)需(xu)(xu)求(qiu)量(liang):不同下(xia)游(you)應(ying)用需(xu)(xu)求(qiu)量(liang)有所區別(bie),制備抗體需(xu)(xu)2~8mg,常規功能學研究10~200ug,細胞實驗(yan)或藥物(wu)研究則需(xu)(xu)更多;
蛋白(bai)純(chun)化(hua)(hua)標簽(qian)(qian)去(qu)留(liu):蛋白(bai)純(chun)化(hua)(hua)標簽(qian)(qian)主要有His,GST,SUMO,MBP等。His標簽(qian)(qian)只有0.84kd,利于純(chun)化(hua)(hua)且(qie)對蛋白(bai)無影(ying)響,可(ke)以保留(liu);其他(ta)屬于大標簽(qian)(qian),可(ke)以提高(gao)蛋白(bai)可(ke)溶性,但(dan)需要切除,否則會影(ying)響蛋白(bai)結(jie)構功能。
E. coli表(biao)達(da)系(xi)統是目前應用最為(wei)廣(guang)泛,也是最為(wei)經濟(ji)實惠的原核蛋(dan)白(bai)(bai)表(biao)達(da)系(xi)統, E. coli細(xi)胞(bao)遺傳(chuan)背景(jing)清楚,目的基因表(biao)達(da)水平高,培(pei)養周期短,抗污染(ran)能力強,易于(yu)放大(da),可以適用于(yu)多(duo)種屬蛋(dan)白(bai)(bai)的表(biao)達(da),是重組蛋(dan)白(bai)(bai)表(biao)達(da)和(he)生物(wu)技術產業(ye)化發展的重要工具,尤(you)其對小分(fen)子蛋(dan)白(bai)(bai)的生產具有極(ji)大(da)的優(you)勢。新貝生物(wu)有大(da)量E. coli 可溶性(xing)蛋(dan)白(bai)(bai)表(biao)達(da)和(he)純(chun)化及(ji)蛋(dan)白(bai)(bai)復性(xing)經驗,擁有多(duo)種E. coli細(xi)胞(bao)株和(he)表(biao)達(da)載(zai)體(ti),為(wei)您提供優(you)質的原核蛋(dan)白(bai)(bai)表(biao)達(da)服務(wu)。
服務優勢:
提供多種表達載體(ti)和E. coli 細胞(bao),實現(xian)從基因(yin)到純(chun)化(hua)后蛋白(bai)的一(yi)站式(shi)服(fu)務
超過10年的(de)蛋(dan)白原核表達經驗
專業博(bo)士從事(shi)蛋白(bai)純化
服務內容:
服務(wu)步驟 | 具(ju)體內容 | 周期 | 交付內容 |
密(mi)碼子(zi)優化及基(ji)因合成(可選) |
| 1-2周 | 含基因(yin)片段或者質粒(li) |
載體構建 | 克隆(long)、測序驗(yan)證、質粒制備(bei) | 1-2周 | 質粒構建(jian)報(bao)告(gao) |
表(biao)達評估 | 選擇合適菌株(zhu)、小(xiao)量表達、SDS-PAGE分析評估蛋白(bai)表達情況 | 1-2周(zhou) | 評(ping)估結果(guo) |
蛋白表達及純化 | 根據表(biao)(biao)達(da)評估選擇合適(shi)條件(jian)進行表(biao)(biao)達(da)純化(hua),并分析結(jie)果 | 2-3周 | 實驗報告、提供蛋白樣(yang)品給客戶 |
大量表達及純化(可選(xuan)) |
| 2-3周 | 實(shi)驗報告、提供蛋(dan)白樣品(pin)給客戶 |
服務流程:
1.雙方溝通確定(ding)蛋(dan)白表達(da)要(yao)求(qiu)
2.簽(qian)訂技術(shu)服務合(he)同(含(han)報價)并(bing)收取預(yu)付款
3.進行蛋白表達(da)可(ke)行性實驗
4.反饋(kui)蛋白(bai)表達可行性實驗結(jie)果 / 寄送樣品(pin)
5.根據客戶要求進行蛋(dan)白表(biao)達的(de)大(da)量生產(合(he)同(tong)如果有)
案例展示: