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Mouse Genotyping Kit
貨(huo) 號：D301
保存條件：Mouse tissue Lysis buffer 2 ~8 ℃，其(qi)余(yu)組分 -20℃
產品介(jie)紹(shao)：
本試劑(ji)盒(he)包含小(xiao)(xiao)鼠DNA粗(cu)提(ti)和PCR擴增體系，適用于鑒定小(xiao)(xiao)鼠基(ji)因(yin)型。小(xiao)(xiao)鼠基(ji)因(yin)組(zu)粗(cu)提(ti)取(qu)僅需要20分鐘，無需繁雜的(de)基(ji)因(yin)組(zu)提(ti)取(qu)操作。本(ben)試劑盒品包含(han)Mouse tissue Lysis buffer 、蛋(dan)白酶K 和(he) 2 x Neo Taq PCR Mix 三個組分。蛋(dan)白酶K搭配Mouse tissue Lysis buffer可以在(zai)15分(fen)鐘內(nei)快(kuai)速釋放基因(yin)組(zu)DNA；2 x Neo Taq PCR Mix 是(shi)為Mouse Genotyping 優化(hua)的(de)Taq mix，以(yi)穩定擴增(zeng)2 kb以(yi)內的(de)片段。
產品組(zu)成：
| 組(zu)分(fen) | D301-01（200次） | D301-02（500次） |
| Mouse tissue Lysis buffer | 20 mL | 50 mL |
| Proteinase K | 0.4 mL | 1 mL |
| 2 × Neo Taq PCR Mix | 2 x 1 mL | 5 × 1 mL |
產品使用：
A.小鼠(shu)基因組DNA粗提
1. 按照一個反應100 μL Mouse tissue Lysis buffer + 2 μL Proteinase K 配制組織消化液，充分混勻。請勿長時間放置。
2. 取1-2 mm小鼠尾巴（小鼠耳朵、腳趾亦可）至離心管，加入100 μL新鮮消化液，混勻并瞬離，確保組織被消化液浸沒。
3. 55℃孵育15 min，95℃孵育5 min 失(shi)活(huo)蛋白酶 K；離心(xin)(12000rpm,5min)后(hou)取上清做PCR模板(ban)。組織塊未完全消化不影響后(hou)續PCR擴增。
B.PCR擴增
1. 2 × Neo Taq PCR Mix 完全(quan)解(jie)凍后，顛(dian)倒(dao)混勻,配置如下(xia)反應體系:
DNase free H2O
| 補(bu)足至 20 μLa |
上游引物（10 μM）
| 0.5 μL |
下游引物（10 μM）
| 0.5 μL |
模板 （小鼠組織裂解液）
| 1-2 μLb |
2 × Neo Taq PCR Mix
| 10 μL |
注：a.可(ke)以(yi)等比例縮放反應(ying)體系體積，但不要(yao)小(xiao)于10 μL；b.加入(ru)模板(ban)量不要(yao)超過2μL(體系的1/10體積),模板(ban)長期保存請置于-20℃冰箱。建(jian)議(yi)每(mei)次添加陰性對照以(yi)排除假陽性結果(guo)。
2. 推薦反應(ying)程序
a：退火溫度一般為在Tm ± 5℃之間嘗試，無產物或者產物少降低退火溫度，有非特異性產物提高退火溫度。
b：加入3條或者3條以上引物，退火時間請增加至35秒，利于多條引物同時退火。
本(ben)品僅供科研使用，不(bu)能用于(yu)人(ren)和動物醫(yi)療診斷
