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HyperScriptTM III RT SuperMix for qPCR
貨 號:R102
保存條件:- 20 ℃長期(qi)儲存
產品介紹(shao):
本品為(wei)針(zhen)對(dui)RT-qPCR優化(hua)的逆(ni)(ni)轉(zhuan)錄(lu)(lu)試(shi)劑盒,使用時(shi)只需加入(ru)RNA模板并補足(zu)水即可(ke)。試(shi)劑盒所使用的逆(ni)(ni)轉(zhuan)錄(lu)(lu)酶(mei)是基(ji)于M-MLV定向進化(hua)而來的新一代(dai)逆(ni)(ni)轉(zhuan)錄(lu)(lu)酶(mei),具有(you)更(geng)低的RNase H活性、更(geng)高的熱穩定性和cDNA合成效(xiao)率,搭配(pei)針(zhen)對(dui)qPCR優化(hua)的逆(ni)(ni)轉(zhuan)錄(lu)(lu)引物配(pei)比,可(ke)以獲得在(zai)RNA各個位置逆(ni)(ni)轉(zhuan)錄(lu)(lu)效(xiao)率均一的cDNA。
產品組(zu)成(cheng):
溫馨(xin)提示:
·5 × RT SuperMix包含逆轉錄所需的(de)全部組分,包含Randomprimers/Oligo (dT)20VN primer mix,因此不適用于基因特異性
引物進行逆轉錄,如有該需(xu)求推薦使用NovaBio R201。
·5 × RT SuperMix含(han)有高濃度的甘油,使用(yong)前請(qing)短(duan)暫(zan)離(li)心,避免槍(qiang)頭插(cha)入管底(di)吸(xi)取(qu)試劑。
·該試劑盒的cDNA產物僅(jin)適(shi)用(yong)于(yu)qPCR實驗,若(ruo)需(xu)要獲得全長(chang)的cDNA,推薦使用(yong)NovaBio R201。
·為保(bao)證(zheng)實驗成功(gong)率和準確(que)性,請勿使用(yong)過(guo)度降解的(de)RNA。
·配置(zhi)反(fan)應(ying)液(ye)時,請使(shi)用RNase-free槍頭、Microtube等。
產品使用:
1.配置(zhi)逆(ni)轉錄反應體系(xi)
請配置如下反(fan)應液:
注(zhu):如(ru)果使用純化后(hou)的mRNA,加入的量10 pg - 500 ng。
2.逆轉錄反應(ying)程(cheng)序(xu)
注:1. HyperScriptTM III 在37-60℃均有(you)較強活性(xing),37℃即可滿足絕大多數實驗;若目標RNA區域有(you)高(gao)GC部分,可提高(gao)逆轉錄溫度至(zhi)50℃。
2. 85℃ 5s 可(ke)以失活(huo)逆轉錄酶和gDNA remover,請勿(wu)省略該步驟。
逆轉錄產物可直接用于(yu)(yu)下游實驗,也可置(zhi)于(yu)(yu)4℃短暫(zan)放(fang)(fang)置(zhi),3-6個月內(nei)-20℃保(bao)存,長期存放(fang)(fang)請置(zhi)于(yu)(yu)-80℃冰箱,小份分裝避免(mian)反復凍融。
本品僅供科研使用,不(bu)能用于人和動(dong)物醫療診斷