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HyperScript^TM III miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (bystem-loop)

貨    　號：R601

保存(cun)條(tiao)件：- 20 ℃長期儲存

產品介紹：

本(ben)品為以(yi)(yi)microRNA(miRNA)為模板利用(yong)(yong)莖環法合(he)成1st Strand cDNA 的試劑盒。通過(guo)使用(yong)(yong)莖環逆(ni)轉(zhuan)錄引物本(ben)試劑盒可以(yi)(yi)合(he)成高度均一的cDNA用(yong)(yong)于qPCR定量(liang)(liang)。試劑盒所使用(yong)(yong)的逆(ni)轉(zhuan)錄酶(mei)是基于M-MLV定向進化而(er)來的新一代逆(ni)轉(zhuan)錄酶(mei)，具(ju)有(you)更低(di)的RNase H活(huo)性、更高的熱(re)穩定性和cDNA合(he)成效率，搭配(pei)為其優(you)化的最適buffer，有(you)利于miRNA特異(yi)性逆(ni)轉(zhuan)錄產物。后續(xu)的miRNA定量(liang)(liang)PCR可以(yi)(yi)使用(yong)(yong)本(ben)公司的2× S6 miRNA SYBR qPCR Mix。莖環引物可咨詢本(ben)公司。

產品(pin)組成(cheng)：

溫馨(xin)提示(shi)：

·5x RT Mix 若出現白色(se)沉(chen)淀，請顛倒混勻確(que)保沉(chen)淀完全溶解(jie)后使(shi)用。

·為保證實驗成功(gong)率和準確(que)性，請勿使用過(guo)度(du)降解的RNA。

·配置反應液時(shi)，請使用RNase-free槍(qiang)頭、Microtube等。

產(chan)品使(shi)用：

1.配(pei)置逆轉錄反應體系

請配置如下反應液：

2.逆(ni)轉(zhuan)錄(lu)反應程(cheng)序

請按如下條件進(jin)行逆轉錄反應(ying)：

注：a. HyperScriptTM III 在37-60℃均(jun)有較(jiao)強活性；若(ruo)目(mu)標RNA區域有高GC部分，可提高逆轉錄溫(wen)度至55℃。

       b.85℃ 5s 可以失活(huo)逆轉錄酶，請勿(wu)省略該(gai)步(bu)驟(zou)。

逆轉錄產物可直(zhi)接(jie)用于(yu)下(xia)游(you)實驗，也可置于(yu)4℃短暫放置，3-6個月內(nei)-20℃保存(cun)，長期存(cun)放請(qing)置于(yu)-80℃冰箱，cDNA小(xiao)份分裝(zhuang)避免(mian)反(fan)復凍融。

4.附莖(jing)環法逆(ni)轉錄過(guo)程(cheng)：

本品僅供科研使(shi)用，不能用于人和動(dong)物醫療診斷(duan)