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4minSpin RNA Purification Kit
貨 號：TQ402
保存(cun)條件：室溫保(bao)存
產(chan)品介紹(shao)：
本品可快本品可快速（4步室溫離心，6分鐘(zhong)等待時(shi)間）從(cong)106-107培養細胞提取(qu)總RNA(miRNA除外)，本(ben)品采(cai)用(yong)(yong)特(te)殊(shu)配方無需酚氯(lv)仿抽提,可以(yi)快速裂(lie)解樣本(ben)并(bing)直(zhi)接結合RNA到柱(zhu)子膜上(省去(qu)加(jia)乙醇步驟)，并(bing)抑制核(he)酸酶(mei)，保(bao)持RNA完整性。所得的RNA可用(yong)(yong)于PCR(貨(huo)號R201、T202、G302)，qPCR(貨(huo)號R202、Q204)等實(shi)驗(yan)。
產(chan)品組(zu)成：
| 組分 | TQ301-01 (50次) |
| Lysis/Binding Buffer（裂解/結合緩沖液） | 2×30 mL |
| Wash Buffer（清洗液,已加乙醇） | 2×60 mL |
| Elution Buffer （洗脫液） | 10 mL |
| 4minSpinTM RNA Columns & collection tubes(RNA吸附柱和收集管套件) | 100套 |
| RNase Free Tubes(1.5 mL無RNA酶離心管，用于裂解樣本和最后一步洗脫使用) | 200個 |
注意事項：
盡量使用新鮮樣本，以保證RNA不被降解。
本說明書推薦的最適細胞量能滿足大部分樣本，對于核酸含量過高或者過低樣本，可酌情減少或者增加起始樣本量。
提取過程在室溫進行，試劑不可冷凍(如有沉淀37℃加熱溶解)，以免產生沉淀堵塞純化柱，最后得到的RNA要分裝冷凍保存。
第一步的樣本裂解很重要，裂解后要清澈透亮，如果有不溶物可(ke)能會堵(du)塞純(chun)化柱。
產品使用：
1.1裂解細胞(bao)：不同培養器皿對應的細胞(bao)量如(ru)下圖，其他類型器皿按照面(mian)積計(ji)算估計(ji)細胞(bao)量：
| 培養器皿 | 單孔面積/cm2 | 細胞量 |
| 12孔培養板 | 4.5 | 1 × 106 |
| 6孔培養板 | 9.6 | 2.5 × 106 |
| 3.5 cm 培養皿 | 8 | 2 × 106 |
| 6 cm 培養皿 | 21 | 5.2 × 106 |
| 25 cm2 培養瓶 | 25 | 5 × 106 |
吸凈培養器皿里的培養液，按照106-107細胞量加入500μl Lysis/Binding Buffer，用移液器反復吹打(或者使用細胞刮刀刮下細胞)，直至細胞全部脫落，轉移到1.5ml RNase Free Tubes，充分顛倒混勻10次，靜置1分鐘。
a. 此步驟也可用胰酶消化貼壁細胞8000rpm離心2分鐘后，加入500μl Lysis/Binding Buffer后續操作如上。
b.懸浮細胞收集8000rpm離心2分鐘后，用100ul PBS重懸后（重懸很重要），加入500μl Lysis/Binding Buffer后續操作如上
c. 如果樣本不立即提取需要保存，可以在上述細胞加500μl Lysis/Binding Buffer充分裂解之后（細胞內也有RNase酶，所以要裂解充分，利于Lysis/Binding Buffer抑制RNase酶），保存到-80℃冰箱
1.2 RNA結合：將上一步裂解產(chan)物轉移到RNA Columns & collection tubes，12000rpm室溫離心1分鐘，棄濾液(ye)。
1.3 RNA清洗：加入500ul Wash Buffer(重(zhong)要，不要增加體積(ji)),12000rpm室溫(wen)離(li)心1分鐘，棄濾液。
1.4 甩干(gan)乙醇：不(bu)加液體，空(kong)離，12000rpm室溫離心1分鐘。
1.5 RNA洗脫：將(jiang)上面的RNA Columns小心(xin)轉移(yi)(重(zhong)要，不要碰到管內液體)到新的1.5ml RNase Free Tubes，在(zai)膜中央（重(zhong)要）加入25-50ul Elution Buffer,室(shi)(shi)溫靜置1分(fen)鐘，12000rpm室(shi)(shi)溫離心(xin)1分(fen)鐘，得到的RNA立即使(shi)用本公司逆轉錄試劑盒（貨號(hao)：R202）進行逆轉錄實驗，或者小份分(fen)裝RNA保存在(zai)負80度冰(bing)箱。
本(ben)品(pin)僅(jin)供科研使用(yong)，不能用(yong)于(yu)人(ren)和(he)動(dong)物醫療(liao)診斷(duan)
